CIBERSORT采用去卷积的算法,基于转录组数据,在混合的细胞中估算出免疫细胞的组成和丰度。
我们先来膜拜一下由斯坦福大学团队开发的在线工具CIBERSORT,这篇文章于2015年发表在Nature Methods上,至今已被引用了700 次,网址为:https://cibersort.stanford.edu/。小编为大家整理了具体的使用方法和注意事项。
Step1. 注册与登陆
进入到网页后,需要注册或登陆。CIBERSORT致力于为科研事业提供免费服务,仅支持持有校园邮箱的用户。
注意:必须使用教育邮箱来注册和登陆。
Step2. 数据准备
需要准备一个表达谱文件,行为基因ID,列为样本名。如下所示:
注意:文件中不可有缺失值;不可有双引号;不要经过log转化。
Step3. 上传数据
点击菜单栏中的Menu,选择Upload Files。
之后跳转到如下界面,首先点击“Add files”,选择表达谱矩阵;再点击“Start Upload”开始上传文件。
注意:CIBERSORT为每名注册用户提供了500Mb的空间来存储数据和结果,若超过这个限制,数据则无法上传至服务器进行分析。
Step4.运行CIRBERSORT
数据上传完毕后,点击Menu→Run CIEBERSORT。
跳到最关键的一步,配置一下CIBERSORT的运行参数,配置完毕后点击最下面的“run”开始运行。
运行的时候需要一段时间,可以将网页关闭,过段时间来收获结果。
Step5. 查询结果
结果在这里等待大家。Menu→Job Results.
所有运行过的结果都在这里,快打开看看吧。
CIBERSORT的使用学习完了,再来看看你那些压箱底的转录组数据、还有数据库中的转录组数据,有没有觉得遍地都是宝藏,还不快拿出来遛一遛?
Ref: Newman A M, Liu C L, Green M R, et al. Robust enumeration of cell subsets from tissue expression profiles[J]. Nature methods, 2015, 12(5): 453.