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在某篇评估转录组各个分析流程所用软件的文章中，fusioncatcher 被评为分析融合基因的最佳工具，该软件的网址如下
https://github.com/ndaniel/fusioncatcher
这个软件的安装过程比较繁琐，依赖很多第三方软件，为了简化安装，官方提供了自动化的安装脚本, 用法如下
代码语言：javascript复制wget http://sf.net/projects/fusioncatcher/files/bootstrap.py -O bootstrap.py
python bootstrap.py -t --download该脚本会自动下载依赖的软件包并安装。软件的使用相对简单很多，分为以下两步
1. 准备参考基因组
fusioncatcher也提供了准备参考基因组的脚本，该脚本会从Ensembl等网站自动下载数据，所以使用时需要联网，用法如下
代码语言：javascript复制fusioncatcher-build -g mus_musculus -o /db/mouse -w asia.ensembl.org-g参数指定参考基因组的物种名称，-o指定输出结果的目录，-w参数指定ensembl web service, 即biomart的的网址。需要注意的是，-w参数一定要设置成上述示例中的样子，默认参数是不可以的，另外对于人和小鼠而言，因为会从gencode数据库下载文件，而gencode的FTP地址发生了变动，所以要手动修改源代码中gencode的FTP地址。
对于-o参数的取值，可以参考如下链接
ftp://ftp.ensembl.org/pub/current_fasta
该目录下每个物种对应一个文件夹，fusioncatcher就是根据-o参数的取值来下载对应物种的序列。
除了下载文件，该步骤还包括建立索引等费时较长的步骤，所以这一步的运行时间会比较久，需要5-10个小时。
对于human而言，官方提供基于Ensembl release 90版本建立的数据库，下载方式如下
mkdir -p /some/human/data/
cd /some/human/data/
wget http://sourceforge.net/projects/fusioncatcher/files/data/human_v90.tar.gz.aa
wget http://sourceforge.net/projects/fusioncatcher/files/data/human_v90.tar.gz.ab
wget http://sourceforge.net/projects/fusioncatcher/files/data/human_v90.tar.gz.ac
wget http://sourceforge.net/projects/fusioncatcher/files/data/human_v90.tar.gz.ad
cat human_v90.tar.gz.* | tar xz
ln -s human_v90 current2. 运行
用法如下
代码语言：javascript复制fusioncatcher
-d database_directory
-i fastq_directory
-o output_directory-d参数指定物种的参考基因组所在目录，-i参数指定样本对应的原始测序数据fastq文件所在目录，-o参数指定输出结果的目录。
对于原始序列所在的目录，在该目录下可以同时存在多个样本的结果，软件会自动识别不同样本对应的R1和R2端数据。
由于fusioncatcher内置了质量控制的程序，会自动对fastq文件进行去除adapter,去除低质量等分析，所以我们只需要提供原始的测序数据就可以了。
在输出目录中，final-list_candidate-fusion-genes.txt 就是最终预测到的所有融合基因，这个目录下文件很多，每个文件的详细解释可以参考官方文档。
·end·
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