欢迎关注”生信修炼手册”!
MACS是一款最为流行的peak calling软件，最初是针对转录因子的chip数据来设计的，在最新版本中，也添加了对组蛋白修饰的适配。目前最新版本为v2.0,官网如下
https://github.com/taoliu/MACS
在2.0版本中提供了以下多个子命令
- callpeak
- bdgpeakcall
- bdgbroadcall
- bdgcmp
- bdgopt
- cmbreps
- bdgdiff
- filterdup
- predictd
- pileup
- randsample
- refinepeak
每个子命令和对应的功能描述如下
本文主要介绍macs2最经典的使用场景peak calling, 基本用法如下
代码语言：javascript复制macs2 callpeak
-t ip.bam
-c input.bam
--outdir out_dir
-n chip
-g hs-t参数指定抗体处理的样本，-c指定input样本，值得一提的是，macs支持多种格式的输入文件，除了上述代码中使用的bam格式外，还支持SAM/BED格式。
--outdir指定输出结果的目录，-n参数指定输出文件名的前缀，-g参数指定基因组的有效大小，在NGS数据中，测序reads在基因组上的覆盖度并不是100%， 而且有些重复区域的比对信息是不可信的，剩下的能够利用的区域通常只占整个基因组区域的70%到90%，这个区域的大小就是有效大小，对于常见的物种，程序内置了有效大小，我们只需要指定物种的缩写即可
对于其他物种，则需要自己指定有效基因组的大小，单位为bp。 输出文件如下
代码语言：javascript复制chip_model.r
chip_peaks.narrowPeak
chip_peaks.xls
chip_summits.bedmodel.r是一个可执行的R脚本，通过以下代码可以产生一个PDF的输出文件
代码语言：javascript复制Rscript chip_model.r第一页表示peak邻近区间正负链测序分布，用于评估d这个参数值，示意如下
第二页是cross-correlation分析的结果，示意如下
后缀为xls的文件是peak的输出结果，内容示意如下
#开头的是注释信息，显示了软件调用的具体命令和参数设置，便于核查；其他的行记录了peak的区间信息，这里的起始位置采用的是从1开始计数的方式。
后缀为narrowpeak的文件是一个BED格式的文件，内容示意如下
前四列代表peak区间和名称，注意bed格式中起始位置从0开始计数，第五列的值为int(-10*log10qvalue)，第六列全部为.,第七列为fold_enrichment,第八列为-log10(pvalue),第九列为-log10(qvalue),第十列为peak的中心，即summit距离peak起始位置的距离，对应abs_summit - start。
后缀为bed的文件为peak中心，即summit对应的bed文件，内容示意如下
最后一列为-log10(qvalue)。以上就是macs2 peak calling的基本用法，更多详细的参数和用法请参考官方文档。
·end·
—如果喜欢，快分享给你的朋友们吧—
扫描关注微信号，更多精彩内容等着你！
