TADbit是一个hi-c数据分析的软件,提供了从原始数据处理到染色质三维模型构建的完整功能,对应的文章链接如下
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5540598/
该软件的pipeline如下图所示
总体分成以下3个功能模块
- FASTQ
- Interacton Matrix
- 3D Models
第一个模块从原始的fastq文件开始,对序列进行质量过滤,采用GEM
软件将clean reads比对参考基因组,然后进行筛选,构建原始的交互矩阵,并进行归一化处理,得到归一化之后的交互矩阵。
第二个模块用于可视化hi-c交互矩阵,并且可以在交互矩阵的基础上,识别TAD
拓扑关联结构域,对TAD
进行可视化,聚类等分析。
第三个模块用于构建染色质三维构象的模型,并进行结构分析。
本文简单整理下第二个模块的具体用法,详细步骤如下
1. 可视化hi-c矩阵
该软件采用python
进行开发,采用了面向对象的编程思想,首先要做的就是构建一个object
, 构建的过程中需要对应的hi-c交互矩阵, 软件自带的测试数据集包含了以下两个hi-c矩阵
HIC_gm06690_chr19_chr19_100000_obs.txt HIC_k562_chr19_chr19_100000_obs.txt
对应GM06690
和K562
两种细胞系19号染色体100kb分辨率下的交互矩阵。基于这两个交互矩阵构建对象并可视化的代码如下
可视化的效果图如下
2. 预测TAD结构域并可视化
有两种可视化的策略,第一种是在hi-c的热图上用矩形标记TAD区域,第二种称之为density plot, 用法如下
热图标记TAD之后的效果图如下
density plot的效果图如下
3. TAD Alignment
将多个细胞或组织的TAD
进行比较,可以分析其位置是否具有保守性。用法如下
效果图如下所示
TADbit的用法简单,可视化效果也很棒,唯一的缺点就是安装特别费劲。